DNA定量試劑盒的檢測規程
更新時(shí)間:2017-07-04 點(diǎn)擊次數:1155
DNA定量試劑盒結果判斷,如果Ct值=40,則實(shí)驗樣品的UU DNA含量(基因拷貝數/ml)<1×103。如果Ct值<40,則實(shí)驗樣品的UU DNA含量(基因拷貝數/ml)= M。檢測樣本中核酸陽(yáng)性時(shí),按實(shí)際結果報告;對可疑結果應復查,需要時(shí)與臨床。注意事項,各標本沸水浴時(shí)間誤差不超過(guò)1分鐘。加樣時(shí)每加完一個(gè)要立即蓋上封閉好離心管。
DNA定量試劑盒操作時(shí),須戴手套。使用新鮮配制的 染色工作液,務(wù)必不要超過(guò) 2 小時(shí),且注意避光。建議使用塑料管配制 染色工作液,而不是玻璃制品。孵育時(shí),避免光照。系統檢測,標準曲線(xiàn)測定 1 次即可;如果儀器更換,則需要重新測定 1 次。如果熒光讀數過(guò)高,可以相應稀釋樣品量??梢允褂脽晒饷笜藘x檢測,試劑用量和體系均除以 5,包括標準 DNA 含量,其計算公式[根據標準曲線(xiàn)獲得樣品對應DNA 濃度(微克)X樣品稀釋倍數]÷0.1(樣品容量;毫升)=微克/毫升。鹽類(lèi)、尿素、乙醇、氯仿、去垢劑、蛋白、瓊脂糖、單鏈 DNA 和 RNA 不會(huì )干擾檢測。
DNA定量試劑盒關(guān)閉擴增儀蓋,按儀器操作規程開(kāi)始循環(huán)。擴增結束后關(guān)閉擴增儀電源,取出PCR反應管,密封放入垃圾桶。產(chǎn)物分析,條件設置:反應結束后自動(dòng)保存檢測數據文件,調整熒光數值為F1/F2。點(diǎn)擊Quantification讀取結果?;€(xiàn)的確定:取3~8個(gè)循環(huán)的熒光信號。