線(xiàn)粒體染色試劑盒的作用說(shuō)明

 

  線(xiàn)粒體染色試劑盒是一種廣泛用于檢測線(xiàn)粒體膜電位△Ψm 的理想熒光探針，JC-1染料表現出電勢依賴(lài)性的積聚在線(xiàn)粒體內。正常線(xiàn)粒體內,JC-1聚集在線(xiàn)粒體基質(zhì)中形成聚合物，聚合物發(fā)出強烈的紅色熒光Ex=585 nm, Em=590 nm不健康的線(xiàn)粒體由于膜電位的下降或喪失，JC-1只能以單體的形式存在于胞漿中，產(chǎn)生綠色熒光（Ex=514 nm, Em=529 nm）。因此顏色的變化非常直接的反映出線(xiàn)粒體膜電位的變化。線(xiàn)粒體的去極化程度也可以通過(guò)紅/綠熒光強度的比例來(lái)衡量。

 

  線(xiàn)粒體染色試劑盒的破壞是細胞凋亡早期發(fā)生的一個(gè)標志性事件。細胞受到凋亡誘導后線(xiàn)粒體膜電位的變化使得膜的通透性發(fā)生改變。膜通透性的增加，使得線(xiàn)粒體蛋白包括細胞色素C、Smac/DIABLO、HtrA2/OMI、核酸內切酶G（EndoG）、凋亡誘導因子（AIF）等從線(xiàn)粒體基質(zhì)釋放到細胞漿。細胞色素C的釋放伴隨膜電位的*喪失，進(jìn)而引發(fā)細胞凋亡酶的級聯(lián)效應.本試劑盒提供了CCCP 作為誘導線(xiàn)粒體膜電位下降的陽(yáng)性對照.對于六孔板中的樣品，本試劑盒共可以檢測100 個(gè)樣品；對于12 孔中的樣品，本試劑盒共可以檢測200 個(gè)樣品.這種特殊的試劑盒被設計為大的斯托克斯位移在Ex/Em = 405/550 nm處標記活細胞線(xiàn)粒體，使之帶橙色熒光；試劑盒使用專(zhuān)有的染料，選擇性地積聚在不同膜電位的線(xiàn)粒體中.是一種疏水性復合物，可以容易地滲透到完整的活細胞中，在進(jìn)入細胞后就被鎖定在線(xiàn)粒體中。這種熒光性線(xiàn)粒體指示劑可以在線(xiàn)粒體中保留很長(cháng)時(shí)間，因為該指示劑帶有能定位于細胞的基團。這個(gè)關(guān)鍵的功能，顯著(zhù)的提高了其染色效率。試劑盒中使用的線(xiàn)粒體染色非常耐光，使得熒光相當強勁。它可以很容易地適應各種各樣的熒光平臺，如微孔板檢測、免疫細胞化學(xué)和流式細胞儀；以及各種各樣有用的的研究，包括細胞粘附、趨化性、多藥耐藥、細胞活力、細胞凋亡和細胞毒性。