帶你了解細胞凋亡檢測試劑盒的知識

　　細胞凋亡是細胞的基本特征之一，它在機體的胚胎發(fā)育、組織修復、內環(huán)境的穩定等方面起著(zhù)十分重要的作用。形態(tài)學(xué)檢測是研究細胞凋亡的基本方法。細胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化是多階段的，起初，細胞間連接和微絨毛消失，細胞體積縮小，胞漿凝縮，內質(zhì)網(wǎng)變疏松并與胞膜融合，形成一個(gè)個(gè)空泡，核糖體與線(xiàn)粒體等細胞器聚集，結構尚無(wú)明顯改變，細胞核內的染色質(zhì)逐漸凝聚成新月?tīng)罡皆诤四ぶ苓?，細胞核固縮呈均一的致密物，進(jìn)而斷裂成碎塊，此時(shí)細胞膜仍保持完整：然后，胞膜及核膜不斷出芽、脫落，一個(gè)細胞變成數個(gè)大小不等的有膜包裹的凋亡小體：最后凋亡小體被周?chē)哂型淌赡芰Φ募毎淌?、消化。上述這些形態(tài)學(xué)的變化，可以通過(guò)本試劑盒中的染色及光學(xué)顯微鏡觀(guān)察。

　　細胞凋亡的一個(gè)顯著(zhù)特點(diǎn)是細胞染色體DNA的降解，這是一個(gè)較普遍的現象。這種降解非常特異并有規律，所產(chǎn)生的不同長(cháng)度的DNA的片段約為180bp-200bp的整數倍，表現為瓊脂糖凝膠電泳中呈現特異的梯狀Ladder圖譜，EZ640TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(遠紅熒光)試劑盒采用TUNEL法，應用末端脫氧核糖核苷酸轉移酶(TerminalDeoxynucleotidylTransferase,TdT)在凋亡細胞斷裂DNA的3´-OH末端催化摻入EZ640-dUTP。EZ640-dUTP標記的DNA可以用熒光顯微鏡直接觀(guān)察或者用流式細胞儀定量。TUNEL法可以選擇性的檢測凋亡細胞，而非壞死細胞或因輻照和藥物治療而造成的DNA鏈斷裂的細胞。TUNEL實(shí)驗中，TdT酶催化dUTP摻入斷裂的DNA鏈的3´-OH末端?？乖瓨擞浀膁UTP（如digoxin-dUTP、生物素-dUTP），因為它可以直接進(jìn)行原位檢測，是一種更快速、直接的檢測手段。