介紹幾種常見(jiàn)的細胞轉染方法

　　細胞轉染技術(shù)主要分為三大類(lèi)：化學(xué)法、物理法及生物學(xué)法。但是沒(méi)有一種方法是放之四海而皆準的，即沒(méi)有任何方法適用于所有細胞和所有實(shí)驗。因而只有依據自己的實(shí)驗要求選擇理想的方法，才能獲得漂亮的實(shí)驗結果。

下面介紹幾種常見(jiàn)的細胞轉染方法：

　　1、DEAE-右旋糖苷法

　　常言道：同性相斥，異性相吸。因而，當帶正電的DEAE-右旋糖苷與核酸中帶負電的磷酸骨架相遇，妥妥的火花四射，而后會(huì )被細胞膜抱團相擁并通過(guò)細胞內吞作用迎客到家。該法可用于瞬時(shí)轉染，操作相對簡(jiǎn)單、結果可重復，但是對細胞有一定的毒副作用，且轉染時(shí)需要血清。

　　2、磷酸鈣法

　　通常穿了“隱身衣”核酸分子在“照妖鏡”磷酸鈣的作用下可形成“肉眼可見(jiàn)”的磷酸鈣-DNA共沉淀，可使共沉淀中濃縮DNA分子與細胞表面結合并通過(guò)內吞作用進(jìn)入細胞。該法可用于瞬時(shí)或穩定轉染。然而因其對pH、溫度和緩沖液鹽濃度的微小變化十分敏感，所得結果容易出現差異，且對許多類(lèi)型的細胞培養物(尤其是原代細胞)具有細胞毒性，轉染效率較差。

　　3、人工脂質(zhì)體法

　　帶正電的脂質(zhì)體與核酸帶負電的磷酸基團形成復合物，進(jìn)而可被細胞內吞穩定轉染/瞬時(shí)性轉染。這種方法幾乎適用于所有細胞，轉染效率高、重復型好，但轉染時(shí)需要去除血清，轉染效果隨細胞類(lèi)型變化大。

　　4、電穿孔法

　　有時(shí)，細胞有些“油鹽不進(jìn)”，就是不開(kāi)放門(mén)戶(hù)給核酸放行，此時(shí)各位小伙伴可采用一些強硬手段—電穿孔法。此法利用高脈沖電壓破壞細胞膜電位，使得DNA通過(guò)膜上形成的小孔導入穩定/瞬時(shí)性轉染，適用于所有類(lèi)型的細胞，但細胞致死率高，DNA和細胞用量大，且需根據不同細胞類(lèi)型優(yōu)化電穿孔實(shí)驗條件。

　　其他物理基因輸送法還包括基因槍、直接顯微注射等方式。前者又稱(chēng)為粒子轟擊，可將包裹著(zhù)核酸的顯微重金屬顆粒告訴射入受體細胞內，適用于瞬時(shí)性轉染。該技術(shù)可需要昂貴的設備，且細胞死亡率較高。而后者則是通過(guò)精細的注射針將核酸送入胞漿中，一次只能輸送一個(gè)細胞中，適用于構建轉基因動(dòng)物或輸送人工染色體。