高保真DNA聚合酶的定義及如何選擇

    DNA聚合酶是PCR反應中*組成部分，是參與DNA復制中的重要酶，被用在生物及醫學(xué)等領(lǐng)域的各個(gè)研究方向上。PCR技術(shù)發(fā)明至今40多年的時(shí)間里，從早期被發(fā)現的Taq DNA聚合酶到現在，酶越來(lái)越多樣化。隨著(zhù)新酶的發(fā)現和對舊酶的改造，DNA聚合酶的保真性、特異性、靈敏度等都獲得了明顯的改進(jìn)。而高保真DNA聚合酶的出現正是順應了市場(chǎng)需求，下面小編將圍繞高保真DNA聚合酶的作用原理和應用方向等進(jìn)行介紹。

　　一、什么是什么是高保真酶

　　高保真DNA聚合酶有聚合中心和酶切中心，聚合中心具有5'→3'的DNA聚合酶活性，可沿5'→3'方向催化合成DNA；酶切中心具有3'→5'外切酶活性，可以進(jìn)行堿基錯配的修復。常見(jiàn)的高保真DNA聚合酶類(lèi)型有Pfu、KOD等。

　　二、如何選擇高保真酶

　　對于測序、基因功能研究、蛋白表達、定點(diǎn)突變等，高保真性的擴增是非常重要的，可以確保各種擴增子的可靠擴增。以測序文庫擴增過(guò)程為例，測序過(guò)程中的突變會(huì )給序列拼接造成困難，甚至會(huì )干擾某些需要低頻檢測的分析結果。對于市場(chǎng)上琳瑯滿(mǎn)目的各種高保真DNA聚合酶，選擇一款合適的酶產(chǎn)品是極為必要的。市面上常見(jiàn)的高保真酶特性主要包含保真度、擴增速率、特異性、是否耐U等。