線(xiàn)粒體染色試劑盒的應用細節

 

  線(xiàn)粒體染色試劑盒用于沉淀真菌/酵母細胞 培養箱：用于染色孵育 （共聚焦）熒光顯微鏡：用于細胞熒光分析 1 實(shí)驗步驟 實(shí)驗開(kāi)始前，將－20 ℃冰箱里的試劑盒中的染色液（Reagent D）置入冰槽里融化，然后分別移 出xx 微升預備液（Reagent C ）和 xx 微升染色液（Reagent D ）到新的 1.5 毫升離 心管，標記為染色工作液，并放在暗室里備用。然后進(jìn)行下列操作。 一、 活體染色 7 1． 準備好 1 毫升新鮮的酵母菌液（OD600 ＝1 至 2 ；1 X 10 細胞/毫升） 2 ． 移入到 1.5 毫升離心管 3 ． 放進(jìn)微型臺式離心機離心 10 分鐘，速度為 1000g （或3000RPM，例如 eppendorf 5415 ） 4 ． 小心抽掉上清液 5 ． 加入 xx 毫升預冷的 清理液（Reagent A ），混勻 6 ． 放進(jìn)微型臺式離心機離心 10 分鐘，速度為 1000g （或3000RPM，例如 eppendorf 5415 ） 7 ． 小心抽掉上清液 8． 重復實(shí)驗步驟 5 至 7 一次 9 ． 加入 xx 升預冷的 清理液（Reagent A ），混勻 10．加入xx 微升含有 預備液（Reagent C ）和染色液（Reagent D ）的染 色工作液，充分混勻

 

  線(xiàn)粒體染色試劑盒是設計用來(lái)標記活細胞的線(xiàn)粒體的，使之帶綠色熒光。本試劑盒使用一種專(zhuān)屬染料，選擇性地在不同膜電位的線(xiàn)粒體中積累。這種線(xiàn)粒體指示劑是一種疏水性復合物，可以輕易地滲透進(jìn)入活細胞中，且當進(jìn)入細胞后就被鎖定在線(xiàn)粒體中。這種熒光性線(xiàn)粒體指示劑可以在線(xiàn)粒體中保留很長(cháng)時(shí)間，因為該指示劑帶有能定位于細胞的基團。其關(guān)鍵特征是其染色效率顯著(zhù)性提高。本標記方法十分穩定，需要親手操作的地方很少。它可以用于許多熒光研究中，例如微孔板分析，免疫組化和流式細胞術(shù)。它也可以用于多種不同類(lèi)型的研究中，包括細胞粘附性、趨化性、多藥物抗性、細胞活性、細胞凋亡和細胞毒性的研究。本試劑盒提供所有的必需組分和*細胞標記方法。它適用于增殖型和非增殖型細胞，也可以用于懸浮和貼壁細胞。