PikoGreen dsDNA定量試劑盒（Broad Range）

產(chǎn)品描述
        PikoGreen是一種極為靈敏的雙鏈DNA熒光染料，僅與DNA雙鏈結合后才發(fā)出熒光，且所產(chǎn)生的熒光與DNA濃度呈正比，在存在ssDNA、RNA和單體核苷酸的條件下，可以選擇性地檢測低至25 pg/mL的dsDNA。與傳統DNA定量方法相比，具有如下優(yōu)點(diǎn)：

• 靈敏：數量級較UV吸光讀數更敏感，可節省樣品。

• 特異性強：只結合dsDNA，特異性強，不受樣品常規污染影響。傳統紫外吸光法容易受樣品中存在的單鏈DNA，蛋白，RNA等影響。

• 耐受性好：耐受較高濃度的鹽、尿素、乙醇、氯仿、去垢劑、蛋白或瓊脂糖，可以直接定量PCR擴增產(chǎn)物而無(wú)需從反應混合物中純化DNA。

1. 線(xiàn)性范圍寬：PikoGreen dsDNA染料測定DNA濃度，在100 pg/mL~100 ng/mL范圍內呈良好線(xiàn)性。

2. 方便操作：在樣品中加入染料，染色5~6 min，然后讀數即可，且適用于96和384孔板。與大多數基于熒光的酶標儀兼容。  

  本產(chǎn)品可適用于各種DNA樣品分析、PCR的分析、芯片樣品、DNA損傷分析、酶活性分析、基因組DNA定量以及復雜混合物中dsDNA的檢測和病毒DNA定量等多種領(lǐng)域。

訂購信息

產(chǎn)品組分

保存方法
      冰袋運輸，4℃避光干燥保存，保質(zhì)期36個(gè)月。如果較長(cháng)時(shí)間不用，建議把組分C與組分D放置于-20℃保存。
使用方法
（以96孔板為例）

1．使用前，將產(chǎn)品從儲存條件下取出恢復至室溫。PikoGreen提供的是DMSO溶液，在4℃存放時(shí)成固體，可37℃水浴溶解。每個(gè)組分應充分震蕩或渦旋混勻、離心，以免造成不必要的試劑損耗。

2．分別吸取19.6 mL組分A， 200 μL組分B， 200 μL組分C配制成20 mL1×PikoGreen工作液。新配工作液應在1 h內使用，工作液存放重新使用時(shí)須重懸，以免染料沉淀，工作液存放24 h，會(huì )輕微影響定量結果。

3．每個(gè)樣品，吸取200 μL 的工作液至黑色的96孔板微孔中。為確保結果精確可靠，建議每個(gè)測試樣品和DNA標樣分別做平行的3個(gè)復孔。

黑色的檢測板可以減少各測試樣品間的熒光干擾。

4．96孔板微孔中，分別加入dsDNA標樣或待測樣品各10 μL，并用移液器輕輕混勻。

5．將微孔板室溫避光孵育10分鐘，在Ex(nm)：350,  Em(nm)：460處用酶標儀測量熒光值。

6．制作標準曲線(xiàn)，計算樣品濃度。

注意事項
1.為了得到最佳結果，請使用精確校準的移液器和去RNA酶的槍頭、試管以及檢測板。
2. 建議檢測時(shí)每個(gè)DNA標樣和未知樣品都設定3個(gè)復孔。如果檢測時(shí)不只一塊96孔板，建議每塊96孔板都設定一條標準曲線(xiàn)，盡量減少檢測板之間的誤差。

3. 為得到最佳結果，檢測板應在一小時(shí)內讀取完畢。如果將反應液重新儲存并在24 h內讀取數據，結果的精確性會(huì )有輕微損失。