SmartCell神經(jīng)酰胺高爾基體染色試劑盒Green

產(chǎn)品描述
　　高爾基體是大多數真核細胞胞質(zhì)內囊泡和折疊膜的復合體，參與分泌和細胞內運輸。它修飾內質(zhì)網(wǎng)（ER）中內置的蛋白質(zhì)和脂質(zhì)，并準備將其輸出到細胞外。它還在脂質(zhì)在整個(gè)細胞中的運輸和溶酶體的形成中起著(zhù)重要作用。
Smart Cell NBD 神經(jīng)酰胺高爾基染色試劑盒提供了一種簡(jiǎn)便，快速的方法，可以選擇性地對活細胞或醛固定細胞中的高爾基染色。將 C6 NBD 神經(jīng)酰胺與牛血清白蛋白（C6-NBD-Ceramide-BSA）形成復合物給予細胞。高爾基體通過(guò)形成相應的熒光代謝產(chǎn)物而被染色。
訂購信息

產(chǎn)品組分

運輸與保存
藍冰運輸。-20℃避光保存，有效期12個(gè)月。
使用方法
簡(jiǎn)要概述
1.根據需要處理細胞。
2.加入 C6 NBD 神經(jīng)酰胺工作溶液，在室溫或 37℃ 下孵育 15-30 min。
3.更換染色緩沖液，在室溫或 37℃ 下孵育 15-30 min。
4.使用 FITC 濾鏡套件在顯微鏡下觀(guān)察。
5.可選：用 4％甲醛固定細胞。
溶液配制
1.儲備溶液配制
除非另有說(shuō)明，否則所有未使用的儲備溶液應分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲存在 -20℃ 下，避免重復凍融循環(huán)。
C6 NBD 神經(jīng)酰胺儲備溶液（100X）：將 100 µL的DMSO（組分 C）加入小瓶 C6 NBD 神經(jīng)酰胺（組分 A）中并充分混合。【注】：將未使用的 C6 NBD 神經(jīng)酰胺原液在 -20℃ 保存，避免凍融循環(huán)。
2.工作溶液配制
C6 NBD 神經(jīng)酰胺工作液：將 10 µL的NBD 神經(jīng)酰胺原液（100X）添加到 990 µL的染色緩沖液（組分 B）中，制成 NBD 神經(jīng)酰胺工作液。
可選：將 10 µL的Hoechst 33342（組分 D）添加到 1mL的NBD 神經(jīng)酰胺工作溶液中以進(jìn)行核染色。
操作步驟
1. 根據需要處理細胞。
2. 直接在細胞培養基中加入 100µL的C6 NBD 神經(jīng)酰胺工作溶液。
3. 在室溫或 37℃ 下孵育 15-30 min。
4. 除去 C6 NBD 神經(jīng)酰胺工作溶液，并用 100 µL /孔的染色緩沖液（組分 B）代替。
5. 在室溫或 37℃ 下孵育 15-30 min。
6. 在裝有 FITC 濾光片的熒光顯微鏡下觀(guān)察。
7. 從步驟 4 中除去染色緩沖液，然后向每個(gè)孔中添加 100 µL /孔/ 96 孔板的 4％ 甲醛固定緩沖液（未提供）。【注】：對于非貼壁細胞，請添加所需量（例如 2X106細胞/ mL）的 4％甲醛固定液。（可選）
8. 在室溫下將平板孵育 20-30 min，去除固定劑。用 PBS 洗滌細胞 2-3 次，然后用 100 µL /孔的染色緩沖液（組分 B）替換。（可選）
注意事項

1. 本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。

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