脂質(zhì)過(guò)氧化傳感器 （Lipid Peroxidation Sensor）

產(chǎn)品描述
脂質(zhì)過(guò)氧化 傳感器 （Lipid Peroxidation Sensor）是一種新型的對Lipid ROS 高選擇性、高靈敏的脂質(zhì)過(guò)氧化 傳感器，與其他ROS捕獲探針不同之處在于，C11-BODIPY 581/591 具有好的親脂性可以快速入膜，隨后可以選擇性的對細胞內和細胞膜中的脂質(zhì)過(guò)氧化(Lipid ROS)進(jìn)行捕獲，并在氧化后仍保持親脂性，不會(huì )離開(kāi)脂質(zhì)膜，該過(guò)程同時(shí)伴隨熒光信號變化。多用于熒光顯微鏡、流式細胞分析等對Lipid ROS 的可視化監測。
脂質(zhì)過(guò)氧化 傳感器結構中多不飽和丁間二烯基在Lipid ROS 催化氧化后，其熒光發(fā)射峰從590 nm偏移至510 nm。
訂購信息

運輸與保存
藍冰運輸。-20℃保存，有效期36個(gè)月。
使用方法
一、樣品溶解
商品開(kāi)封后，離心機輕甩；隨后加入適量DMSO 進(jìn)行溶解，溶解度至少可達25mg/mL。溶解后建議分裝 -20℃ 避光保存，盡量避免反復凍融，防止吸潮?！咀ⅰ浚簶悠份p甩目的是為了避免痕量的探針吸附管壁損失樣本。
二、樣品使用
1.  流式細胞分析：

1. 懸浮細胞：800 g 離心5 min 收集細胞沉淀；隨后PBS 洗滌細胞兩遍。

2. 貼壁細胞：棄培養液，用常溫PBS 或培養液輕洗細胞2 次，隨后胰*消化，800g 離心5 min 收集細胞沉淀，隨后PBS 洗滌細胞兩遍，每個(gè)樣本收集1~5 ×10⁵ 個(gè)細胞?！咀ⅰ浚翰僮鬟^(guò)程中輕柔吹打細胞，消化時(shí)間不宜過(guò)長(cháng)，劇烈吹打或胰*消化過(guò)度會(huì )影響實(shí)驗結果。

3. 脂質(zhì)過(guò)氧化 傳感器用于脂質(zhì)過(guò)氧化檢測的推薦濃度為終濃度5μM；配制方法：用新鮮空白培養液配制終濃度為5μM 的脂質(zhì)過(guò)氧化傳感器染色液待用，DMSO 含量≤5‰?！咀ⅰ浚涸摬讲僮鹘ㄗh在消化細胞前準備好，以免細胞消化后久置影響實(shí)驗結果。

4. 將事先配置好的脂質(zhì)過(guò)氧化染色液加入收集的細胞沉淀中，推薦體積為500μL，隨后置于37℃孵箱，染色30min，期間5-10min 間隔輕彈細胞使其懸浮保證染色更充分。

5. 染色結束后，800 g 離心5 min，棄上清，隨后用PBS 清洗細胞2 次，加入200μLPBS 重懸細胞用于流式分析。

2.  原位成像：

1. 接種適當密度的細胞于20mm 規格的蓋玻片上（也可用共聚焦小皿替代），給予實(shí)驗藥物處理適當時(shí)

2. 間后，吸去培養液，用PBS 洗滌細胞一遍；加入500 μL 配制好的脂質(zhì)過(guò)氧化染色液，于37℃染色30min；配制方法參考流式分析中的染色液配制。

3. 棄培養液，PBS 洗滌細胞兩遍后于熒光顯微鏡或激光共聚焦下進(jìn)行成像檢測。細胞在染色后應在1 h之內完成檢測。

3.  檢測條件：
該分子探針在還原狀態(tài)下最佳激發(fā)波長(cháng)為581 nm, 發(fā)射為591nm；被Lipid ROS 氧化后最佳激發(fā)波長(cháng)
為500 nm，發(fā)射在510nm。因此，在流式分析中檢測通道為FL1-A；激光共聚焦檢測：氧化態(tài)激發(fā)波長(cháng)可
選488nm（FITC）通道；還原態(tài)激發(fā)波長(cháng)可選561 nm（TRITC）通道。
注意事項

1. 本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。

2. 使用前小心離心數秒取用，需佩戴手套操作，注意避免與皮膚、眼睛和黏膜接觸。

3. 本試劑盒可用檢測活細胞中Lipid ROS 水平，用于評價(jià)細胞鐵死亡狀態(tài)。

4. 流式分析效果圖、原位成像圖詳見(jiàn)官。

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