PEI轉染試劑常見(jiàn)問(wèn)題

Q：C4058L1080和C4058L1090有什么區別？

A：我們有兩種，80是針對線(xiàn)性的，90是支鏈轉染，比如慢性病包試劑用90比較好。  

Q：李記細胞轉染液和PEI固體自行配制溶液相比的優(yōu)勢在哪里？

A：很多客戶(hù)買(mǎi)固體很難把握的，固體非常不容易溶解，包裝比較大，用的不多建議您選液體的，已做無(wú)菌處理，可以直接使用。

Q：接種細胞，必須用膠原酶消化？胰酶不能用么？

A：膠原酶從細菌中提取出來(lái)的酶，對膠原有很強的消化作用，適于消化纖維性組織、上皮組織以及癌組織，它對細胞間質(zhì)有較好的消化作用，對細胞本身影響不大，可使細胞與膠原成分脫離但不受傷害。膠原酶消化的不是細胞表面，而是細胞間質(zhì)。

         胰酶消化作用于與賴(lài)氨酸或精氨酸相連接的肽腱，除去細胞間粘蛋白及糖蛋白，影響細胞骨架，從而使細胞分離。對細胞有輕微影響，進(jìn)而影響后續轉染效率及細胞活性，在一定程度上體現為轉染試劑的毒性。

Q：使用方法提到，轉染細胞時(shí)將復合物（40ul質(zhì)粒稀釋液+40ul 轉染試劑稀釋液）滴入到含細胞的培養皿中。此時(shí)含細胞的培養皿里面有含血清的培養基么？如果有，體積是多少？以24孔板為例，是0.5ml么？

A：培養皿中培養基成分為正常培養細胞的成分，原來(lái)培養時(shí)有血清，那就有。培養孔中培養液的體積也是正常情況，你說(shuō)的對，如果是24孔板，那么體積應該是0.5ml

Q:轉染細胞步驟中提到，去除含復合物的培養液之后呢？要加含血清的培養基么？加多少，以24孔板為例？加完培養基后繼續培養？培養多久？

A:去除含復合物的培養基，過(guò)程是逐步的，有兩個(gè)目的，一是盡可能提高轉染效率，二是盡可能降低細胞毒性。減少EZ Trans-DNA復合物的過(guò)程，也是恢復到細胞正常培養基成分的過(guò)程。后續培養多久，說(shuō)明書(shū)為建議時(shí)間，你可以通過(guò)實(shí)驗摸索，要根據你的轉染效率，基因表達情況確定。

Q:轉染細胞步驟中提到，這里的7h，指的是去除含復合物的培養液換成含血清的培養基之后的7h，還是指加入復合物后轉染7h?- 同樣的，“24-48小時(shí)內檢測轉染效率”指的是去除含復合物的培養液換成含血清的培養基之后的24-48h，還是指加入復合物后轉染24-48h？

A:所有時(shí)間都是從EZ Trans-DNA復合物與細胞接觸開(kāi)始算.