介紹重組腸激酶的使用注意事項

　　重組腸激酶（Enterokinase,lightchain）是一種高度專(zhuān)一性識別Asp-Asp-Asp-Asp-Lys序列的蛋白酶，在Lys的C端水解多肽。它可以將胰蛋白酶原轉變?yōu)橐让?，也可以將帶有這個(gè)識別序列的融合蛋白切開(kāi)。由于腸激酶具有高度專(zhuān)一性，水解效率高的特點(diǎn)，它被廣泛地應用于基因工程產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)，其應用之一是作為工具蛋白酶用于重組融合蛋白質(zhì)的特異性斷裂，尤其適用于生物工程制藥業(yè)及基因工程、生物化學(xué)、分子生物學(xué)等研究。

　　腸激酶具有高度專(zhuān)一性，水解效率高的特點(diǎn)，它被廣泛地應用于基因工程產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)，其應用之一是作為工具蛋白酶用于重組融合蛋白質(zhì)的特異性斷裂，尤其適用于生物工程制藥業(yè)及基因工程、生物化學(xué)、分子生物學(xué)等研究。本重組表達產(chǎn)品攜帶his標簽，便于切割目標蛋白后除去，保證酶切的可控性和特異性。

　　重組腸激酶的注意事項

　　在＞200mM咪唑，或＞200mMNaCl，或＞5%甘油，酶切效果受影響?？蓞⒄找韵峦扑]方法進(jìn)行酶切：

　　1、為獲得理想酶切結果，請將樣品透析到25mMTris-HCl8.0緩沖液中，再進(jìn)行酶切。

　　2、若不便透析，可將樣品稀釋?zhuān)溥蚝吭?00mM以下，NaCl濃度在50mM以下，甘油濃度小于5%以下進(jìn)行酶切，酶的用量與蛋白的比例不變（即1U酶切500µg蛋白）。

　　3、如果樣品溶液中含有上述成分中的一種或多種，且不便去除，此時(shí)適當增加酶量或延長(cháng)酶切時(shí)間，也可達到較好酶切效果。