細胞周期檢測試劑盒Plus

產(chǎn)品描述
　　Cell Cycle and Apoptosis Kit Plus（細胞周期檢測試劑盒Plus）采用RedNucleus I染色法檢測細胞周期，RedNucleus I是一種遠紅外核酸染料，具有細胞膜透性，可快速進(jìn)入活細胞，特異結合DNA，對活細胞進(jìn)行周期檢測，且無(wú)需RNase的消化。與傳統的碘化丙啶染色（PI staining）方法相比，細胞無(wú)需破膜或固定，操作更加簡(jiǎn)便。
　　RedNucleus I是一種雙鏈DNA的熒光染料，與雙鏈DNA結合后的熒光強度和雙鏈DNA的含量成正比?？赏ㄟ^(guò)流式細胞儀測定細胞內DNA含量，然后根據DNA含量的分布情況，進(jìn)行細胞周期分析。RedNucleus I 染色后，假設G0/G1期細胞的熒光強度為1，那么含有雙份基因組DNA的G2/M期細胞的熒光強度的理論值為2，正在進(jìn)行DNA復制的S期細胞的熒光強度為1-2之間。此外，RedNucleus I與Horizon BV / BUV、FITC和R-PE等染料兼容，可在樣品染色后進(jìn)行周期檢測。
　　本試劑盒通常應用于培養的貼壁或懸浮細胞的細胞周期檢測，如果用于組織的細胞周期檢測，則必須先把組織消化成單細胞狀態(tài)。
訂購信息

產(chǎn)品組分

運輸與保存
　　藍冰運輸。-20℃保存，組分B需避光保存。有效期24個(gè)月。【注】：短期使用請保存于4℃。
操作步驟
1.細胞樣品的準備：
（1）（此步驟是針對貼壁細胞，若為懸浮細胞，可直接進(jìn)行第2步）用yi、mei消化細胞，加入細胞培養液，輕輕吹散細胞后，收集到離心管內。
（2）1000 g左右離心3-5 min，沉淀細胞。小心吸除上清，加入約1 mL冰浴預冷的1×的染色緩沖液（將10×的染色緩沖液用diH2O 按1：10 稀釋?zhuān)?，重懸細胞。重復一次?/span>
（3）1000 g左右離心3-5 min，沉淀細胞。棄上清后，加入1 mL 培養基重懸細胞（對于固定細胞，也可用1×PBS 重懸）。輕輕彈擊離心管底以適當分散細胞，避免細胞成團。
2.染色：
（1）每管細胞樣品中加入4 μL 的RedNucleus I 染色液，緩慢并充分混勻，室溫避光孵育20 min（或在37 ℃避光孵育5-10 min）。
3.流式檢測和分析：
（1）用流式細胞儀在638 nm 處激發(fā)，推薦在RL3或FL4 通道檢測，也可使用RL1、RL2通道檢測。采用適當分析軟件進(jìn)行細胞DNA含量分析和光散射分析。
注意事項
1.該產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。
2.本產(chǎn)品適用于活細胞和固定細胞周期檢測。如需固定，推薦使用冰浴預冷75-80% 的乙醇過(guò)夜固定細胞。
3.熒光染料均存在淬滅問(wèn)題，保存和使用過(guò)程中請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。
4.為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。
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