總RNA提取試劑盒（trizol）

產(chǎn)品描述
    TRIzol的主要成分是異硫 qíng 酸胍，它可以破壞細胞，使細胞RNA釋放出來(lái)，同時(shí)保護RNA的完整性，因此，常用于動(dòng)植物細胞RNA的提取。
訂購信息

運輸與保存
常溫運輸。4℃避光保存，有效期12個(gè)月。
使用方法
1.準備樣品
（1）組織樣品
液氮研磨組織法，組織塊直接放入研缽中，加入少量液氮，迅速研磨，待組織變軟，再加少量液氮，再研磨，如此三次后，按組織樣品質(zhì)量與 T R I z o l 體積按照50~100mg/mL加入，勻漿。
【注】：組織體積不能超過(guò) T R I z o l 體積的10%， 否則勻漿效果不好，用電動(dòng)勻漿器勻漿約需1~2 min 。
（2）細胞
對于培養貼壁細胞:不須消化，可直接用 T R I z o l 進(jìn)行消化及裂解， T R I z o l 體積按10cm2/mL比例加入。
對于懸浮細胞可直接收集，消化裂解，每1 mL T R I z o l 可裂解 5×10⁶動(dòng)物、植物或酵母細胞，或1×10⁷細菌細胞。

2. 細胞或組織加 T R I z o l 后，室溫放置5 min,使其充分裂解。

【注】：此時(shí)可放入﹣70℃長(cháng)期保持。

3. 12,000g離心5 min,棄沉淀。

4. 按200 μL氯仿/ml T R I z o l 加入氯仿，振蕩混勻后室溫放置15 min。

【注】：禁用漩渦振蕩器，以免基因組DNA斷裂。
5. 4℃,12,000g離心15 min 。

6. 吸取上層水相，至另一離心管中。

【注】：千萬(wàn)不要吸取中間界面:若同時(shí)提取DNA和蛋白質(zhì)，則保留下層酚相存于4℃冰箱，若只提RNA,則棄下層酚相。
7. 0.5ml異丙醇/mI T R I z o l 加入異丙醇混勻，室溫放置5~10 min 。
8. 4℃ 12,000g離心10 min, 棄上清，RNA沉于管底。

9. 按1 mL 75%乙醇/ml T R I z o l 加入75%乙醇，溫和振蕩離心管，懸浮沉淀。

10. 4℃ 8,000g 離心5 min, 盡量棄上清液。

11. 室溫晾干或真空干燥5~10 min。

【注】：RNA樣品不要過(guò)于干燥，否則很難溶解。
12. 可用50 μL H2O、TE buffer或0.5%SDS溶解RNA樣品，55~60℃ ,5~10 min。
【注】：H2O.TE或0.5%SDS均須用DEPC處理并高壓。
注意事項
1.操作人員應經(jīng)過(guò)專(zhuān)門(mén)培訓，嚴格遵守操作規程。
2.操作處置應在具備局部通風(fēng)或全面通風(fēng)換氣設施的場(chǎng)所進(jìn)行。
3.避免眼和皮膚的接觸，避免吸入蒸汽。
4.遠離火種、熱源，工作場(chǎng)所嚴禁吸煙。
5.整個(gè)提RNA過(guò)程需要無(wú)RNase的實(shí)驗用具。
6.本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。
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