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細胞轉染步驟

簡(jiǎn)要描述:細胞轉染步驟,EZ Trans細胞轉染試劑經(jīng)過(guò)李記生物的優(yōu)化處理,具有轉染效率高,細胞毒性低,操作簡(jiǎn)單,重復性好,適用范圍廣等特點(diǎn)。

  • 產(chǎn)品型號:AC04L091
  • 廠(chǎng)商性質(zhì):生產(chǎn)廠(chǎng)家
  • 更新時(shí)間:2024-07-02
  • 訪(fǎng)  問(wèn)  量:1345

詳細介紹

品牌其他品牌貨號AC04L091
供貨周期現貨應用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè),綜合

 

EZ Trans細胞轉染試劑EZ 慢病毒系列/細胞轉染步驟

轉染試劑產(chǎn)品描述

EZ Trans細胞轉染試劑作為新一代的轉染試劑,其轉染原理是帶正電的陽(yáng)離子聚合物與核酸帶負電的磷酸基團形成帶正電的復合物后與細胞表面帶負電的蛋白多糖相互作用,并通過(guò)胞吞作用進(jìn)入細胞。

產(chǎn)品經(jīng)過(guò)李記生物的優(yōu)化處理,具有轉染效率高,細胞毒性低,操作簡(jiǎn)單,重復性好,適用范圍廣等特點(diǎn)。

以下為高效轉染試劑說(shuō)明書(shū),其他產(chǎn)品詳情請問(wèn)銷(xiāo)售人員。

細胞轉染試劑與慢病毒訂購信息

產(chǎn)品名稱(chēng)

貨號

規格

價(jià)格

EZ Trans Plus細胞轉染試劑(Ⅱ)

AC04L011

1 mL

690

EZ Trans細胞轉染試劑(高效)

AC04L091

1 mL

300

EZ Trans細胞轉染試劑(高效)

AC04L092

50 mL

3200

EZ Trans細胞轉染試劑(低毒

AC04L098

1 mL

300

EZ Trans細胞轉染試劑(低毒

AC04L099

50 mL

3200

EZ 慢病毒感染增強劑

AC04L432

50 mL

1800

EZ 慢病毒感染增強劑

AC04L433

100 mL

3200

EZ慢病毒濃縮液

AC04L441

50 mL

780

EZ慢病毒濃縮液

AC04L442

100 mL

1280

EZ慢病毒載體凍存保護液

AC04L452

50 mL

780

EZ慢病毒載體凍存保護液

AC04L453

100 mL

1280

轉染試劑運輸與保存

藍冰運輸。4℃保存,有效期12個(gè)月。】:不可冷凍!

高效轉染試劑使用方法(以 24 孔板為例,其他培養皿中轉染請參考表1)

1. 接種細胞

對于貼壁細胞,轉染前18-24 h進(jìn)行鋪板(不含抗生素),使其在轉染時(shí)的密度大約在80%左右。對于懸浮細胞,轉染當天,配制EZ Trans-DNA復合物之前進(jìn)行鋪板,每500 µL生長(cháng)培養基中加入4~8×105cells。  

【注】:培養液中的血清不影響轉染效率。轉染試劑使用量受細胞類(lèi)型及其他實(shí)驗條件影響,建議初次使用時(shí)設置梯度進(jìn)行優(yōu)化最佳使用量。

2. 準備EZ Trans-DNA復合物

1對于每孔細胞,將1 μg質(zhì)粒DNA稀釋到40 μL無(wú)血清的高糖DMEM培養基(或者OPTI-MEM Ⅰ 培養基),混勻。

2對于每孔細胞,將3 μL EZ Trans轉染試劑稀釋到40 μL無(wú)血清的高糖DMEM培養基(或者OPTI-MEM Ⅰ 培養基),輕輕混勻。

【注】:無(wú)血清的高糖DMEM培養基是稀釋液,不能使用含血清的培養基進(jìn)行DNA和EZ Trans轉染試劑的稀釋。因為EZ Trans-DNA轉染復合物的形成過(guò)程不能含有血清。

3將稀釋好的EZ Trans轉染試劑盡快全部加入到已稀釋好的質(zhì)粒DNA中,輕輕混勻。

【注】:此混合的順序不能反向進(jìn)行。

4室溫放置10-15 min,以形成EZ Trans-DNA復合物。

3. 轉染細胞

1將上述80 μL EZ Trans-DNA轉染復合物均勻滴入到含細胞的培養皿中。輕輕晃動(dòng)培養皿或輕微振蕩,讓EZ Trans-DNA復合物分散均勻。

237℃,5% CO2培養箱培養6-18 h,去除含EZ Trans-DNA復合物的培養液,更換新的培養液,繼續培養至對轉入基因表達分析。

【注】:篩選穩定轉染細胞株,轉染細胞24 h后,將細胞傳代至新鮮的生長(cháng)培養基中(將細胞稀釋10倍以上),在37℃,5% CO2培養箱中孵育24 h,加入篩選培養基。在有轉染抗性基因相匹配的藥物篩選條件下,約 1~2周可篩選到耐藥性克隆,在這期間需經(jīng)常更換含篩選藥物的生長(cháng)培養基。

注意事項

  1. 本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。

公司簡(jiǎn)介

  上海李記生物科技有限公司是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售為一體的高科技生物技術(shù)企業(yè),產(chǎn)品涵蓋細胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、動(dòng)物學(xué)等,我們的產(chǎn)品都基于設計,在保證品質(zhì)的前提下,具有易用、經(jīng)濟、高效的特點(diǎn)。
  我們立志做百年企業(yè),我們愿與您一同成長(cháng),很多我們的產(chǎn)品創(chuàng )意來(lái)自于像您一樣的客戶(hù)老師,我們提供的不僅是產(chǎn)品,還有一個(gè)創(chuàng )新平臺,我們期待您的參與,攜手發(fā)展,共創(chuàng )輝煌。實(shí)現中國夢(mèng),是全民族的事,生命科學(xué)領(lǐng)域中的你我同樣肩負使命,讓我們用不同的方式貢獻自己的力量!

  李記優(yōu)勢產(chǎn)品:蛋白Marker、EZ Trans細胞轉染液、CCK-8細胞活性增殖檢測試劑、支原體快速檢測試劑盒、核酸染料(GelRed)、EZ Protein any KD PAGE蛋白電泳試劑盒、熒光染料(Alexa Fluor 488, 555, 647,CY3, cy5)、胎牛血清、細胞凋亡檢測試劑盒、細胞轉染步驟等。

相關(guān)產(chǎn)品推薦

活性檢測CCK-8細胞增殖與毒性檢測試劑盒(貨號:AC11L053)

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