EZ Trans RNA轉染試劑

產(chǎn)品描述
EZ Trans RNA轉染試劑（下文簡(jiǎn)稱(chēng)EZ Trans）采用新型脂質(zhì)體納米材料，可用來(lái)轉染siRNA、miRNA等150bp以?xún)鹊男》肿覴NA和DNA，轉染細胞包括絕大多數貼壁生長(cháng)的細胞，如一般細胞株、腫瘤細胞株等。
本轉染試劑是一類(lèi)快捷高效即用型試劑溶液，僅需在EP管中將細胞培液與siRNA或miRNA等轉染目的小 RNA同轉染試劑混合，室溫孵育約 2 min后加入*細胞培養液中即可，血清對轉染效果沒(méi)有影響，實(shí)驗過(guò)程無(wú)需刻意添加或更換培養液。
訂購信息

運輸與保存
藍冰運輸。4℃保存，有效期 12 個(gè)月。  【注】： 不可冷凍！
使用方法（以 24 孔板為例，其他培養皿中轉染請參考表 1）
1. 接種細胞
對于貼壁細胞，轉染前 18-24 h 進(jìn)行鋪板，本轉染試劑要求細胞鋪板密度不高，建議 70%-90% 為佳。【注】：培養液中的血清不影響轉染效率。轉染試劑使用量受細胞類(lèi)型及其他實(shí)驗條件影響，建議初次使用 時(shí)設置梯度進(jìn)行優(yōu)化最佳使用量。
2. 準備EZ Trans-轉染目的小RNA(siRNA或miRNA等)復合物
（1）對于每孔細胞， 將 20 pmol待轉染目的小RNA(siRNA或miRNA等)稀釋到 50 μL 基礎培養基或*培養基中（無(wú)需額外的Opti-MEM培養基），混勻。
（2）對于每孔細胞，將 1.25-2.5 μL（視細胞類(lèi)型調整）EZ Trans 轉染試劑添加到上述步驟（1）中的混合培液中，輕輕混勻。
（3）室溫孵育約 2 min。
3. 轉染細胞
（1）將上述孵育完成的轉染復合物均勻滴入到含細胞的培養皿中。輕輕晃動(dòng)培養皿或輕微振蕩，讓轉染復合物分散均勻。
（2）在 37℃，5% CO2 培養箱培養 24-48 h，無(wú)需更換新的培養液，之后即可對轉入基因表達分析。
注意事項
1. 本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。
2. 小RNA(siRNA或miRNA等)質(zhì)量：請務(wù)必使用高純度無(wú)內毒素轉染級RNA。
3. 細胞條件：使用適當保存和經(jīng)常傳代的健康細胞。確保細胞沒(méi)有被細菌、真菌或支原體污染。如果細胞 是近期復蘇的液氮凍存細胞，請在轉染前至少傳代兩次。
4. 細胞培養液要求：EZ Trans 細胞轉染試劑可用于有血清培養基的轉染，并且轉染前后不需要換培養基。確保細胞培養液沒(méi)有被細菌、真菌或支原體污染。
5. 試劑用量的優(yōu)化：RNA 濃度和轉染試劑使用量受細胞類(lèi)型及其他實(shí)驗條件影響，初次使用應優(yōu)化 RNA 濃 度和轉染試劑量以得到最大的轉染效率。使用者可嘗試每 20 pmol RNA 使用 1～4 μL 體積EZ Trans細胞轉染試劑進(jìn)行優(yōu)化。




表 1：不同培養體積對應的待轉 RNA、 EZ Trans、稀釋液用量

【注】：該表使用量?jì)H供參考，具體使用量還需根據細胞類(lèi)型及其他實(shí)驗條件進(jìn)行優(yōu)化。


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